大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞是骨髓中除造血干細(xì)胞以外的另一種重要的成體干細(xì)胞,參與構(gòu)成造血微環(huán)境,同時(shí)還具有多向分化潛能、低免疫原性、取材方便、擴(kuò)增迅速、遺傳背景穩(wěn)定等特點(diǎn),在組織工程和細(xì)胞及基因治療等方面具有廣闊的應(yīng)用前景。
產(chǎn)品分別取自人及合格的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物骨髓,傳代擴(kuò)增后凍存,檢測(cè)結(jié)果表明,本產(chǎn)品無(wú)細(xì)菌、真菌和支原體污染,表達(dá)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞特異性標(biāo)記,具有良好的增殖和分化潛能,可分化為成骨細(xì)胞、脂肪細(xì)胞、軟骨細(xì)胞等。
大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞分離自骨髓;骨髓是機(jī)體的造血組織,位于身體的許多骨骼內(nèi);成年動(dòng)物的骨髓分兩種:紅骨髓和黃骨髓。紅骨髓能制造紅細(xì)胞、血小板和各種白細(xì)胞。血小板有止血作用,白細(xì)胞能殺滅與抑制各種病原體,包括細(xì)菌、病毒等;某些淋巴細(xì)胞能制造抗體。因此,骨髓不但是造血器官,它還是重要的免疫器官。
骨髓是存在于長(zhǎng)骨(如肱骨、股骨)的骨髓腔和扁平骨(如髂骨)的稀松骨質(zhì)間的網(wǎng)眼中,是一種海綿狀的組織,能產(chǎn)生血細(xì)胞的骨髓略呈紅色,稱(chēng)為紅骨髓。出生時(shí),紅骨髓充滿全身骨髓腔,隨著年齡增大,脂肪細(xì)胞增多,相當(dāng)部分紅骨髓被黃骨髓取代,最后幾乎只有扁平骨骨髓腔中有紅骨髓。骨髓基質(zhì)系統(tǒng)內(nèi)存在的骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞是一種除造血干細(xì)胞以外的、具有高度自我更新能力和多向分化潛能的干細(xì)胞,可以向骨、軟骨、肌組織、皮膚、脂肪、神經(jīng)等多種組織分化,因此可以作為組織工程中的種子細(xì)胞。
骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的體外培養(yǎng)條件要求較高,在培養(yǎng)過(guò)程中,受貼壁時(shí)間、種植密度、血清含量、培養(yǎng)溫度和培養(yǎng)基pH值等條件的影響。全骨髓法即根據(jù)干細(xì)胞在低血清培養(yǎng)基中有貼壁優(yōu)勢(shì)特性,定期換液除去不貼壁細(xì)胞,從而達(dá)到純化及擴(kuò)增MSC的目的。密度梯度離心法即根據(jù)骨髓中各細(xì)胞成分比重的不同,分離單核細(xì)胞進(jìn)行貼壁培養(yǎng),經(jīng)過(guò)流式或磁珠分選后的細(xì)胞出現(xiàn)了增殖緩慢等一些問(wèn)題,加之成本較高和技術(shù)的難度,在某種程度上限制了這些方法的廣泛應(yīng)用。